丁基疏水色谱柱是一款以粒径为2.5耻尘的，丁基键合无孔型亲水性聚合物基质为填充剂的疏水作用色谱柱。适用于蛋白质、单抗、酶等生物大分子的分离分析。由于和药物安全以及生产成本息息相关，对于重组蛋白药物（包括单抗）的非均一性分析变得越来越被重视。
采用具有适度疏水性的填料，以含盐水溶液作流动相，借助于溶质与固定相间的疏水相互作用实现分离的色谱方法。其保留机理与反相色谱基本相同，所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相强，多为低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色谱主要用于蛋白质的分离与纯化。
1、样品准备：确保样品溶解在适当的溶剂中，并进行充分的混匀。避免样品中存在杂质或固体颗粒，以防堵塞柱子。
2、柱子条件：选择适当的柱子尺寸和填料粒径来满足所需的分离效果。通常，较小的填料粒径可以提供更好的分离效果，但也会增加柱子背压。
3、流动相选择：丁基疏水色谱柱需要使用有机溶剂作为流动相的一部分。常见的有机溶剂包括甲醇、乙醇、乙腈等。根据待分离化合物的性质选择适当的流动相组合。
4、温度控制：某些情况下，温度对于改善分离效果非常重要。可以通过升高或降低温度来调整选择性和峰形。
5、柱子保护：在使用丁基疏水色谱柱时，建议在样品进样之前使用保护柱。保护柱通常是与分离柱相同的填料材料，但长度较短。它可以防止样品中的杂质堵塞和损坏分离柱。
6、流速控制：选择合适的流速以获得理想的分离效果。过高的流速可能导致峰形变宽或峰形畸变。
7、柱子维护：定期进行柱子的维护和清洗操作，以确保其性能和寿命。遵循制造商提供的指南和推荐。
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