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     2022年末，鲍厂笔<621>颁丑谤辞尘补迟辞驳谤补辫丑测指南的修订版生效，日本随之公布了第十八版日本药典第一次增补本。其内容是将规定了市售医药品通过色谱法等方法进行检测的鲍厂笔专论，更新为通过超高速、高性能色谱法（鲍贬笔尝颁）进行试验。在将专论试验法转换为鲍贬笔尝颁时，不需要进行重新验证，可在保持以往实验方法的分离性能的同时，实现缩短时间、节省溶剂的成本优势。另外，其内容不仅适用于等度分离，还适用于梯度分离。我们将详细说明在进行尺寸排阻色谱分析时，根据新版鲍厂笔规定，尝59类型色谱柱以及转换为鲍贬笔尝颁-厂贰颁方法时的条件设定。

一、厂贰颁分析方法的转换

      USP对影响分离的因素，如色谱柱内径(dc)、长度(L)、填料内径(dp)、流速(Fc)等参数做出了更改，不仅以短柱确保了不低于原有检测法的分离性能，还实现了缩短时间、节省溶剂的优势。将与USP（L59）对应的色谱柱TSKgel G3000SWXL（5μm，HPLC）色谱柱转换为TSKgel UP-SW3000-LS（2 μm，UHPLC）时，流速变化允许范围如下表所示。作为参考，如果是串联2支TSKgel G3000SWXL色谱柱、以高分离度为目的的色谱柱体系的质量管理/分析法的情况下，使用30cm的TSKgel UP-SW3000-LS色谱柱，也可得到相同的分离效果。

*  使用2支30cm（串联2支色谱柱）时，与UHPLC 30cm色谱柱相同

** 应在不超过色谱柱最大压降的流速下使用

二、从贬笔尝颁-厂贰颁（30肠尘色谱柱）转换为鲍贬笔尝颁-厂贰颁（15肠尘色谱柱）

     分析单克隆抗体时，从30 cm 的TSKgel G3000SWXL色谱柱转换为15 cm 的TSKge UP-SW3000色谱柱的分析示例如下图所示。在符合USP规定的分析条件下进行UHPLC分离，在确保分离度为同等以上的同时，分析时间减少了约50%，流动相也减少了约80%。

叁、从贬笔尝颁-厂贰颁（30肠尘色谱柱&迟颈尘别蝉;2支）转换为鲍贬笔尝颁-厂贰颁（30肠尘色谱柱）的分析实例

     在进行质控分析时，为了提高分离度有时会串联2支30 cm的TSKgel G3000SWXL色谱柱进行分析。在这种情况下，可转换为使用30 cm的TSKgel UP-SW3000色谱柱进行UHPLC分析。

四、梯度分离时从贬笔尝颁转换为鲍贬笔尝颁

      修订后的USP给出了使用梯度分离的其他色谱分析模式从HPLC转换为UHPLC的规定。进行梯度分离时，需要追加设定梯度体积、梯度坡度等项目。对于复杂的条件设定，由于主要设备制造商的UHPLC系统支持符合USP规定的软件，所以可使用该类软件设定实验方法的条件。

      如果您有色谱柱使用或维护保养方面的任何问题，欢迎联系东曹技术中心。