根据流动相和固定相相对极性不同,液相色谱分为正相色谱和
反相色谱柱。流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱柱。非极性键合相色谱可作反相色谱柱。在现代液相色谱中应用醉广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。
反相色谱柱是指利用非极性的反相介质为固定相,极性有机溶剂的水溶液为流动相,根据溶质极性(疏水性)的差别进行溶质分离与纯化的洗脱色谱法。与贬滨颁一样,搁笔颁中溶质也通过疏水性相互作用分配于固定相表面,但是,搁笔颁固定相表面*被非极性基团所覆盖,表现出强烈的疏水性。因此,必须用极性有机溶剂(如甲醇、乙腈等)或其水溶液进行溶质的洗脱分离。
反相色谱柱的安装步骤:
1、首先应确认柱和仪器的接头以及管路是否匹配。为减少死体积,进样阀、柱子、检测器之间的连接管路内径尽可能使用内径较小的管线,同时控制进样器、色谱柱和检测器之间连接管线的长度。安装色谱柱之前,确认流路系统中的溶剂是否正常。对分析较复杂的样品建议安装保护柱。
2、为了使色谱柱与仪器系统达醉佳的连接效果,应尽量使用与色谱柱接口相匹配的螺帽和锥形接头,如原来的接头长期匹配其他类型的色谱柱,建议在连接新色谱柱前应检查匹配情况,避免造成色谱柱的损坏或因色谱柱不匹配造成的漏液。
3、使用PEEK 材料的通用接头,只需用手拧紧不需要特定扳手,使用压力为5000psi;使用温度不得超过100℃。