离子交换色谱法是通过试样离子在离子交换剂(固相)和淋洗液(液相)之间的分配系数不同,从而使欲测组分与干扰组分达到分离的一种固-液分离法。该色谱法实际是离子交换原理和液相柱色谱技术的有机结合,现已广泛应用于无机离子或有机离子混合物的分离,因此应用范围广泛。
离子交换色谱的优点是:
⑴具有开放性支持骨架,大分子可以自由进入和迅速扩散,故吸附容量大。
⑵具有亲水性,对大分子的吸附不大牢固,用温和条件使可以洗脱,不致引起蛋白质变性或酶的失活。
⑶多孔性,表面积大、交换容量大,回收率高,可用于分离和制备。
离子交换色谱柱常见问题分析:
1、离子色谱柱柱压升高可能的原因有:&苍产蝉辫;
(1)离子色谱柱过滤网板被玷污,需要更换。&苍产蝉辫;
(2)柱接头拧得过紧,使输液管端口变形。&苍产蝉辫;
(3)PEEK 材料的管子切口不齐。
2、分离度降低可能的原因有: 系统有泄漏时分离度会降低;分离柱被玷污后柱容量因子 k’值变小;淋洗液类型和浓度 不合适等。
3、死体积增大 分离柱入口树脂损失造成死体积增大或树脂床进入空气使树脂床产生沟流会使分离度 下降。若分离柱入口处出现空隙,可填充一些惰性树脂球以减小死体积的影响。
4、保留时间缩短或延长色谱峰保留时间的改变会影响待测组分的定性和容量,因为在色谱分析中稳定的保留时间对获得准确、可靠的结果是十分重要的。